1. Kullanım Amacı ve Avantajları
CHYE Broth, mikroorganizmaların hızlı büyüme fazına geçmesini ve maksimum biyokütleye ulaşmasını sağlar:
Moleküler Biyoloji: Plazmid üretimi ve rekombinant protein ekspresyonu için bakteri kültürlerinin büyütülmesinde kullanılır.
Toksin ve Enzim Üretimi: Staphylococcus aureus gibi bakterilerin enterotoksin üretimini incelemek için optimize edilmiş bir ortamdır.
Besin Desteği: Standart besiyerlerinde üremekte zorlanan bakteriler için hazır amino asit ve B vitamini kaynağı sunar.
2. Teknik Özellikler ve İçerik
Besiyerinin 1 litredeki tipik bileşimi (~30.0 - 40.0 g/L):
Casein Hydrolysate (Kazein Hidrolizatı): Proteinlerin yapı taşı olan amino asitleri ve kısa peptidleri doğrudan sağlar. Bakterinin protein sentezi için harcayacağı enerjiyi minimize eder.
Yeast Extract (Maya Ekstresi): B kompleks vitaminleri, karbonhidratlar ve büyüme faktörleri (pürinler, pirimidinler) bakımından zengindir.
Sodium Chloride ($NaCl$): Ortamın ozmotik dengesini korur.
Dipotassium Phosphate (
$K_2HPO_4$): pH tamponu olarak görev yapar. pH Değeri: 25°C'de $7.0 \pm 0.2$ düzeyindedir.
3. Hazırlama Talimatı
Tartım: 1 litre distile su içerisine yaklaşık 30.0 gram (etiket üzerindeki tam miktar) toz besiyeri eklenir.
Çözme: Tamamen çözünene kadar karıştırılır. Berrak, kehribar rengi bir sıvı elde edilir.
Sterilizasyon: 121°C'de 15 dakika boyunca otoklavda sterilize edilir.
İlave (Opsiyonel): Eğer belirli suşlar için glikoz veya magnezyum gibi ek besinler gerekiyorsa, bunlar sterilizasyon sonrası aseptik olarak eklenebilir.
4. Uygulama ve Gözlem
İnkübasyon: Genellikle 35-37°C'de 18-24 saat boyunca, tercihen çalkalamalı inkübatörlerde (aerasyonu artırmak için) inkübe edilir.
Değerlendirme: Besiyerindeki bulanıklık (türbidite) artışı mikrobiyal üremeyi temsil eder. Spektrofotometre ile $OD_{600}$ değerleri ölçülerek büyüme hızı takip edilebili
