Kullanım Amacı ve Prensibi
Burkholderia cepacia, dezenfektanlara ve birçok antibiyotiğe karşı yüksek direnç göstermesi nedeniyle kontrol edilmesi zor bir mikroorganizmadır. ADVENT Burkholderia Cepacia Agar Base, bu dirençliliği ve bakterinin spesifik metabolizmasını ayırt edici özellik olarak kullanarak, laboratuvar ortamında bu mikroorganizmanın izole edilmesine olanak tanır.
- Seçicilik: Besiyeri tabanına eklenen Burkholderia Cepacia Selective Supplement, Gram-pozitif bakterileri, mayaları ve Pseudomonas aeruginosa dahil olmak üzere Bcc dışındaki birçok Gram-negatif bakteriyi güçlü bir şekilde baskılar. Bu özellik, Burkholderia cepacia’nın izole edilmesini ve tanımlanmasını kolaylaştırır.
- Diferansiyasyon (Renk Değişimi): B. cepacia, besiyerindeki pirüvatı kullanarak alkali yan ürünler açığa çıkarır. Bu reaksiyon sonucunda, pH indikatörleri olan Fenol Kırmızısı ve Bromotimol Mavisi sayesinde besiyerinin rengi başlangıçtaki turuncu-yeşil tondan pembe-kırmızıya döner. Bu renk değişimi, bakterinin varlığını ve metabolik aktivitesini görsel olarak değerlendirmeye olanak tanır.
Teknik Özellikler ve İçerik
ADVENT Burkholderia Cepacia Agar Base, 1 litredeki tipik bileşimi ile mikrobiolojik analizler için ideal bir ortam sunar. İçeriği aşağıdaki gibidir:
- Peptones (Casein ve Meat): Azot, amino asit ve temel büyüme faktörleri sağlar, böylece bakteriyel büyümeyi destekler.
- Yeast Extract (Maya Ekstresi): B vitamini kompleksleri sunarak bakterilerin gelişimini teşvik eder.
- Pyruvate (Pirüvat): Temel karbon ve enerji kaynağıdır; metabolik renk değişimi için gereklidir.
- Sodium Chloride (NaCl): Ozmotik dengeyi sağlar, böylece hücrelerin sağlıklı bir şekilde büyümesine yardımcı olur.
- Magnesium ve Ferrous Sulfate: Büyümeyi teşvik eden iyonlardır, bakteriyel metabolizmayı destekler.
- Phenol Red & Bromothymol Blue: pH değişimini takip eden çift indikatör sistemi, bakteriyel aktiviteyi izlemek için kullanılır.
- Agar: Katılaştırıcı ajan olarak işlev görür, besiyerinin yapısını korur.
- pH Değeri: 25°C’de 6.2 ± 0.2 düzeyindedir, bu da bakteriyel büyüme için uygun bir ortam sağlar.
Hazırlama Talimatı
ADVENT Burkholderia Cepacia Agar Base’in hazırlanması, laboratuvar standartlarına uygun olarak gerçekleştirilmelidir:
- Tartım: 1 litre distile su içerisine yaklaşık 35.0 gram toz besiyeri eklenir.
- Çözme: Tamamen çözünene kadar karıştırılarak ısıtılır ve 1 dakika kaynatılır.
- Sterilizasyon: 121°C’de 15 dakika boyunca otoklavda sterilize edilir.
- Selektif Ekler (Kritik): Otoklav sonrası besiyeri 45-50°C’ye soğutulduğunda, aseptik olarak Burkholderia Cepacia Selective Supplement eklenir (genellikle Gentamicin, Vancomycin ve Polymyxin B içerir).
- Döküm: Homojen hale gelene kadar karıştırılır ve petri kaplarına dökülür.
Uygulama ve Değerlendirme
Plaklar genellikle 30-35°C’de 48 ila 72 saat (yavaş üreyen suşlar için 96 saate kadar) boyunca inkübe edilir. Bu süre zarfında, Burkholderia cepacia’nın varlığı ve metabolik aktivitesi, besiyerindeki renk değişimi ile kolayca değerlendirilebilir. Bu özellik, laboratuvar ortamında mikroorganizmanın izole edilmesi ve tanımlanması için kritik öneme sahiptir. ADVENT Burkholderia Cepacia Agar Base, mikrobiolojik araştırmalar ve klinik uygulamalar için güvenilir bir araç sunmaktadır.